Trabajos Finales (Bioquímica)
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Examinando Trabajos Finales (Bioquímica) por Autor "Dadé, Martin"
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- ÍtemAnálisis Probit en el estudio de la actividad letal de los insecticidas metopreno y el sinergista butóxido de piperonilo en Triatoma infestans(Universidad Nacional Arturo Jauretche, 2021) Ruiz, Luciana MabelIntroducción: La enfermedad de Chagas es endémica en 21 países del continente americano y está ocasionada por el parásito hemoflagelado Trypanosoma cruzi. De acuerdo a la Organización Mundial de la Salud (OMS), actualmente existen entre 7 y 8 millones de infectados por T. cruzi y 65 millones de personas en riesgo de contraer el parásito. El principal vector de T. cruzi en el Cono Sur es Triatoma infestans. La principal estrategia para el control de T. infestans es el rociado con insecticidas en los domicilios y peridomicilios de las zonas endémicas de la enfermedad. Objetivos: -Determinar la eficacia triatomicida del insecticida metopreno en ninfas de T. infestans mediante el modelo estadístico Probit. -Estudiar la activida letal de la combinación de metopreno con el sinergista butóxido de piperonilo en T. infestans utilizando el análisis Probit. Materiales y métodos: Los ensayos se llevaron a cabo en el laboratorio de Artrópodos y Vectores (LabArVec), Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de La Plata. Los insectos fueron colocados en contenedores de plástico de 15 cm de diámetro. La cría de los insectos se realizó en condiciones controladas de temperatura de temperatura (28±1°C), de humedad (50-70%) y un fotoperiodo de 12:12 horas (luz:oscuridad). Los ejemplares de T. infestans fueron alimentados con sangre de gallinas una vez por semana. Durante el presente trabajo se utilizaron dos poblaciones de vinchucas. Una población fue iniciada con insectos enviados desde el Centro de Referencias de Vectores (CeReVe). Esta colonia fue utilizada como referencia o susceptible, ya que estos ejemplares son mantenidos desde el año 2010 sin exposición a insecticidas. En cuanto a la otra colonia de insectos utilizada en este trabajo, las vinchucas iniciadoras de la colonia fueron capturadas en la localidad de Salvador Mazza, Salta, Argentina. En esta zona, las campañas de rociado con piretroides para el control de T. infestans son consideradas ineficaces debido a la rápida reinfestación con vinchucas que se registra en los hogares. A esta colonia se la denominó como colonias de Salvador Mazza (CSM). Todos los ensayos de este trabajo final se llevaron a cabo con ninfas de quinto estadio de ambas poblaciones. La elección de este estadio del desarrollo de T. infestans tiene que ver con que es el estadio que mayor resistencia demostró hacia los piretroides. Resultado: El estudio de la actividad triatomicida se llevó a cabo mediante ensayos de topicación. A partir de esta técnica se determinó la DL50 del metopreno y el piretroide deltametrina en las dos poblaciones de vinchucas en estudio. Al comparar la potencia de ambos insecticidas, el metopreno demostró en ambas colonias de vinchucas una mayor potencia que la deltametrina. Cabe destacar, que si bien en el caso de la CR de vinchucas, la potencia del metopreno (DL50: 60,5ng/insecto) fue levemente superior a la observada con la deltametrina(DL50: 62,5ng/insecto), en el caso de las vinchucas CSM se reportó una diferencia importante en la actividad letal de los insecticidas, para estos insectos se necesitó una dosis 682 veces mayor de deltametrina (DL50:22497ng/insecto) con respecto a la descrita para el metopreno (DL50:33 ng/insecto). Al comparar la actividad letal de ambos insecticidas entre las vinchucas CR y CSM se observó una diferencia importante entre la susceptibilidad hacia la deltametrina por parte de los individuos de ambas colonias. Para las vinchucas provenientes de CSM la dosis del piretroide necesaria para eliminar al 50% de los insectos fue 360 veces superior a la registrada entre los insectos de la CR. Demostrando de esta manera una importante resistencia hacia la del tametrina por parte de las vinchucas de CSM. En cuanto al metopreno, al contrario de lo observado para la deltametrina, la comparación de la DL50 registrada para ambas colonias en estudio, demostró una mayor susceptibilidad para los insectos provenientes de la CSM (GR50:0,4), que para las vinchucas de la colonia de CR (GR50: 0,5). En cuanto al efecto sinérgico del PBO en la actividad letal de la deltametrina, se pudo constatar una diferencia significativa entre lo reportado en la CR en comparación con las vinchucas provenientes de CSM. La actividad del sinergista se incrementó en las vinchucas CSM a deltametrina, reduciéndose 7.5 veces la dosis necesaria para eliminar al 50% de los insectos. En comparación, el GR50 observado para las ninfas de CR fue de tan solo 2.2. Con respecto al estudio del efecto del PBO en la actividad letal de metopreno se constató un importante efecto sinérgico en ambas poblaciones de insectos, siendo mayor, en el caso de las ninfas provenientes de CSM. Por último, en los ensayos llevados a cabo en el presente trabajo, se determinó el tiempo necesario de cada insecticida para alcanzar su máxima actividad letal en las ninfas de T. infestans. Para el caso de la deltametrina el efecto máximo en ambas colonias de vinchucas fue observado a las 24 h de haber sido topicada. Cabe resaltar, que este comportamiento letal no fue modificado por la presencia del sinergista PBO. A diferencia de lo descrito anteriormente con la deltametrina, en el caso de las vinchucas CR se constató una actividad letal máxima del metopreno recién a las 96 h de haber sido topicado en las ninfas. En las ninfas de provenientes de CSM la actividad máxima se observó a las 72 h postopicación. En las ninfas CR, la combinación de PBO con el metopreno aceleró la actividad máxima del insecticida a 48 h postratamiento. Discusión y conclusión: La actividad letal demostrada por el metopreno en combinación con el PBO en ninfas de T. infestans susceptibles y resistentes a deltametrina, posiciona a este insecticida como una alternativa plausible para el control del vector. En cuanto al modelo Probit, podemos afirmar que fue el modelo estadístico adecuado para determinar la diferencia de susceptibilidad a insecticidas por parte las dos colonias de vinchucas utilizadas en este trabajo. Este modelo nos permitió cuantificar mediante la comparación de las DL50 obtenidas, la diferencia de susceptibilidad entre una población de vinchucas sin contacto con insecticidas versus individuos provenientes de una zona en donde el uso de deltametrina como método de control ha fracasado sistemáticamente durante los últimos 20 años.
- ÍtemEstudio de la actividad letal y repelente de extractos de Cannabis sativa de la variante Deep Mandarin en ninfas de Triatoma infestans(Universidad Nacional Arturo Jauretche, 2023) Diaz, Fabiana SusanaLa enfermedad de Chagas es una zoonosis producida por el parásito hemoflagelado Trypanosoma cruzi. T. cruzi es transmitido a través de insectos vectores pertenecientes a la subfamilia Triatominae (Hemiptera: Reduviidae) y posee como huésped a más de 100 especies de mamíferos, incluyendo al hombre. El control químico con insecticidas se ha transformado a lo largo de los años en una herramienta fundamental para el control de los vectores de T. infestans. Sin embargo, el uso irracional por más de cincuenta años de estos insecticidas provocó la aparición de vinchucas resistentes a piretroides. En recientes estudios se ha puesto en evidencia el uso de bioinsecticidas para el control de vectores. Los bioinsecticidas tienen como ventaja su alta seguridad y especificidad, su naturaleza biodegradable y su bajo costo. En este contexto, en los últimos años extractos y aceites esenciales obtenidos de Cannabis sativa han sido objeto de distintos estudios para investigar su posible actividad como insecticida/acaricida. Teniendo en cuenta lo antes mencionado, los objetivos del presente trabajo fueron estudiar la actividad letal y repelente de extractos de Cannabis sativa variante Deep Mandarine en triatominos, realizar la caracterización química por cromatografía de gases y evaluar la toxicidad de dichos extractos en una especie beneficiosa como son las abejas (Apis mellifera). Para cuantificar estos efectos se realizaron ensayos de de topicación, de contacto con superficies tratadas con los extractos, mientras que, para cuantificar la repelencia de los extractos su utilizó la técnica de preferencia de área. Los tres extractos evaluados demostraron tener actividad letal sobre las ninfas de vinchucas. El extracto acetonic fue el más potente de los tres. Los tres extractos también demostraron una alta actividad repelente, que inclusive, fue similar al repelente de insectos N,N-diethyl-m-toluamide (DEET) utilizado como control positivo. Por último, ninguno de los extractos de C. sativa demostró actividad letal sobre adultos de abejas. Los resultados presentados en este trabajo pueden contribuir como una alternativa interesante y efectiva que pueda reemplazar a los insecticidas sintéticos utilizados en la actualidad.
- ÍtemEstudio de la actividad letal y repelente del monoterpeno geraniol y el piretroide deltametrina en ninfas de Triatoma infestans(Universidad Nacional Arturo Jauretche, 2022) Rodas, Carla BeatrizTriatoma infestans (vinchucas) constituye el principal vector del parásito Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la Enfermedad de Chagas. La herramienta más eficaz para el control de las vinchucas son los insecticidas del tipo piretroides. La presencia de vinchucas resistentes a piretroides trae aparejado la necesidad de buscar nuevas alternativas para su eliminación. Los bioinsecticidas se posicionan en la actualidad como una alternativa novedosa, menos agresiva para el ambiente y de menor costo con respecto al uso de los insecticidas sintéticos tradicionales.El geraniol es un monoterpeno que ha demostrado tener actividad insecticida y repelente en insectos. Los objetivos del presente trabajo fueron determinar y comparar la actividad letal y repelente del insecticida piretroide deltametrina y el bioinsecticidasgeraniol. El geraniol demostró tener similar actividad letal en las ninfas susceptibles y resistentes a piretroides. Cuando ambos insecticidas se combinaron, el geraniol reportó un efecto sinérgico en la letalidad de la deltametrina. En cuanto a la actividad repelente, a bajas concentraciones el geraniol demostró menor potencia que el DEET, sin embargo, cuando ambas moléculas fueron combinadas la presencia del monoterpeno aumento la capacidad de repelencia del DEET. Los resultados presentados en este trabajo de investigación pueden constituir un primer paso para posicionar al monoterpeno geraniol como una alternativa para el control integrado de T. infestans. Nuevos trabajos son necesarios con el objetivo de dilucidar los mecanismos de acción por los cuales esta molécula causa los efectos letales y de repelencia en este trabajo descriptos.
- ÍtemEvaluación de la actividad letal y repelente de extractos de Cannabis sativa en combinación con inhibidores de enzimas detoxificantes en ninfas de Triatoma infestans(Universidad Nacional Arturo Jauretche, ) Leonart, Tamara LujánEn la actualidad, la enfermedad de Chagas constituye un problema de salud pública en el territorio nacional. Esta zoonosis es transmitida por insectos triatominos. En Argentina, el principal vector de la enfermedad es Triatoma infestans, popularmente conocida como vinchuca. Este vector pica en zonas expuestas de la piel y defeca, permitiendo la entrada al torrente sanguíneo del parásito hemoflagelado Trypanosoma cruzi. Mientras que en etapas tempranas puede tratarse con antiparasitarios y curarse, una vez instalada la cronicidad del cuadro es muy difícil tratarlo y son más frecuentes las complicaciones, por lo tanto, es indispensable el diagnóstico temprano. Como es una enfermedad asociada a zonas rurales y pobres, el acceso del personal de salud es complejo, en consecuencia, desde hace años las políticas públicas apuntan al control vectorial, entre otras estrategias, para disminuir la cantidad de infectados. En la actualidad, la principal herramienta para el control de los triatominos es el uso de insecticidas sintéticos del grupo químico piretroides. Los reportes publicados sobre la presencia de poblaciones de vinchucas resistentes a este químico pone en juego el éxito final del control del vector. En este contexto, se plantea el requerimiento de nuevos métodos efectivos para disminuir las poblaciones del insecto. La alternativa que se explora en estudios recientes es el uso de bioinsecticidas. En este trabajo se evaluó la letalidad y repelencia de los extractos acetónicos y etanólicos de Cannabis sativa y el D-limoneno sobre T. infestans, evaluando su interacción con inhibidores de enzimas detoxificantes, butóxido de piperonilo (PBO) y trifenil fosfato (TPP). Los resultados apuntaron a una efectividad mayor cuando los extractos y el limoneno se pre incubaron con PBO, mientras que TPP no tuvo acción sobre el extracto etanólico. La repelencia fue de 100% para los tres compuestos evaluados a 50μg/cm2 sostenidos durante 48 hs. El extracto acetónico tuvo mejor performance en relación a los parámetros del tiempo y potencia repelente. Del mismo modo, fue el mejor sinergista de la deltametrina, frente a JET y el D-limoneno con un IC de 0.35.